手性柱堵了要怎么進行處理?手性柱堵了的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高,直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端,最主要原因就是流動相里有雜質(zhì),雜質(zhì)的主要來源就是細菌。
1、先把柱子卸下來看看柱壓,如果壓力升高是柱子引起的處理柱子,如果柱子卸下來柱壓還是挺高那么就不是你的柱子的柱壓高,而是別的地方有堵塞。柱子柱壓高時可以先用含水比例較大的系統(tǒng)沖一下,要是系統(tǒng)中有鹽析出而導(dǎo)致的柱壓升高時這樣應(yīng)該可以使柱壓適當?shù)慕档?;沖完后若柱壓還是沒有降低可用適當比例的異丙醇沖洗,利用異丙醇的粘度沖出系統(tǒng)中的析出物質(zhì)。
2、將柱子反接,用10%~90%的甲醇沖洗,10%幾甲醇保留10倍柱體積,90%至少保留10倍柱體積。沖完后用50:50=乙腈:異丙醇沖洗至少10倍柱體積??梢栽诩状己退锌紤]加入0.1%的甲酸。
3、第一要檢查是柱子的原因還是系統(tǒng)的原因,可以換跟新的柱子試試或者在另一臺液相上用你的柱子測一下壓力,從而可以檢查是哪個出了問題。
4、不光要看你的流動相,還要看看你的樣品做什么,生物樣品還是普通樣品,要是生物樣品建議用乙腈沖洗看看,雖然現(xiàn)在乙腈的價格是飆漲,要是還有鹽的樣品也還是要用高比例的水沖洗的。
5、柱壓高有許多原因,要是柱子里有臟東西,可以用甲醇多沖沒也可以將柱子反接用甲醇沖洗。還可以先超聲一下再沖洗。要看具體的原因了。
6、進樣管路堵塞:卸下進樣閥和柱子之間那根細管絲,放入異丙醇中(浸沒),超聲1小時以上。
如果你確定是堵塞了,就用純乙腈反沖,先用低一點的流速,比如0.1ml/min,看壓力情況,不要超過200bar,再慢慢提高流速,但不要超過1.0ml/min的流速,如果是真的堵了,可能會壓力慢慢降下來的。