使用質譜引導怎樣實現(xiàn)手性化合物純化呢？根據(jù)FDA的規(guī)定1，手性色譜已經(jīng)成為藥物開發(fā)早期為通過藥理學、毒理學和臨床信息準確鑒定單一純對映體并進行分離的首選工具。

　　超臨界流體色譜（SFC）因其具有更高的效率、更大的通量和更寬的適用性而被證實成為手性化合物分離的一種主流技術。手性SFC越來越受到關注并且其應用范圍不斷擴大，在一些情況下逐漸成為首選方法。

　　通常情況下，對映體混合物含有一定數(shù)量的雜質，對于常用的疊加進樣和基于信號閾值的收集策略而言（例如UV/PDA檢測），這些雜質可降低實際純化過程的效率。多數(shù)情況下，進行一步預凈化是必要的，但因存在資金和工作量限制卻是不實際的。這需要一種能將對映體與其它雜質鑒別開來的多功能檢測方案。除了UV/PDA檢測器之外，3100型質譜檢測器是一種可廣泛用于手性分離的理想選擇。

　　在本應用文獻中，展示了質譜引導的Prep 100 SFC系統(tǒng)及其在開放床式平臺上進行疊加進樣和收集的功能，并被證實是一種手性化合物純化的有效工具。下文回顧并描述了用于手性分離案例的系統(tǒng)配置和方法。

　　試驗

　　化學品

　　CO2由Airgas（Salem，NH，USA）公司提供，并以加壓液體的形式在大約1100–1300 psi的條件下，通過內(nèi)置管道供應給質譜引導的Prep 100 SFC系統(tǒng)。甲醇和反式芪氧化物（T SO，MW：196）由Sigma-Aldrich（St.Louis,MO,USA）提供。

　　SFC色譜柱

　　ChiralPak AD-H和ChiralCel OD-H（均為21 mm x 250 mm、5μm）由Chiral Technologies公司（West Chester，PA，USA）提供。

　　SFC系統(tǒng)

　　質譜引導的Prep 100 SFC系統(tǒng)配備一個附加的疊加進樣器。

　　2767型樣品管理器配置為一個簡化型重復餾分收集器。

　　方法條件

　　SFC梯度和流速程序

　　對于所述的全部數(shù)據(jù)而言，100 g/分鐘的最大總流速與各種等度的改性劑程序配合使用。

　　質譜檢測器的條件

　　用于各種試驗的3100型質譜檢測器標準ESI模式使用以下關鍵參數(shù)：

　　毛細管電壓：3.5 KV

　　錐孔電壓：40.0 V

　　二級錐孔電壓：3.0 V

　　射頻透鏡電壓：0.1 V

　　源溫度：150?C

　　脫溶劑氣溫度：350?C

　　脫溶劑氣體流速：400 L/小時

　　錐孔氣體流速：60 L/小時

　　0.1%的甲酸-甲醇溶液用作補償液流進入質譜，以提高電離效率。

　　數(shù)據(jù)管理

　　MassLynx/FractionLynx，第4.1版

　　結果和討論

　　疊加進樣模式下的純化放大

　　手性分離中通用的最佳做法是利用疊加進樣模式進行樣品進樣和餾分收集，這可實現(xiàn)效率最大化并降低生產(chǎn)成本。

　　在含有一定雜質的復雜體系中，質譜引導的系統(tǒng)可以鑒定和選擇性的收集感興趣的目標化合物，并正確的忽略不需要雜質。因而，該系統(tǒng)對于手性化合物的SFC純化，具有高效、適用范圍廣的特點，并成為手性藥物開發(fā)的常規(guī)主流工具。

　　我們對質譜引導的Prep100 SFC系統(tǒng)進行了一定的改造，以便將該系統(tǒng)用于手性化合物分離純化時達到其最大效益，其中包括添加了一個專用進樣器并改變了收集床布局以容納更大的容器，從而可重復收集對映體的餾分。