手性藥物是指藥物分子結(jié)構(gòu)中引入手性中心后，得到的一對互為實(shí)物與鏡像的對映異構(gòu)體。液相色譜法是目前手性藥物分離測定的首選方法，本文根據(jù)實(shí)際工作中出現(xiàn)的手性藥物分離問題總結(jié)分享，歡迎同行一起探討。

手性分析關(guān)鍵的一步是流動相的選擇，一般采用正相。

使用最多的流動相是：正己烷、正庚烷、乙醇和異丙醇，起洗脫作用的流動相是乙醇和異丙醇，正己烷和正庚烷用來調(diào)節(jié)流動相的洗脫強(qiáng)度。

正己烷和正庚烷對樣品的分離沒有太大影響，不會改變選擇性和分離度，不過正庚烷比正己烷對人體的傷害要小很多，但價(jià)格是后者的一倍，所以歐美的很多大制藥公司多使用正庚烷，而國內(nèi)多使用正己烷。

乙醇和異丙醇對樣品的分離起關(guān)鍵的作用，不同的醇有不同的選擇性，改變醇的種類可以改變選擇性，最常用的醇類是乙醇和異丙醇。甲醇不使用是因?yàn)樗驼和?、正庚烷不互溶，叔丁醇粘度太大，一般作為添加劑配合乙醇或者異丙醇少量使用，提供特殊的選擇性，通常能起到意想不到的效果。手性色譜柱

手性流動相里經(jīng)常需要添加酸或者是堿來調(diào)節(jié)峰形

常用的酸：乙酸和甲基磺酸

常用的堿：二乙胺和三乙胺，也有用乙醇胺和異丁胺的

流動相里添加酸和堿的濃度一般要求控制在0.2%(體積比)以下，使用的原則一般是酸性樣品加酸，堿性樣品加堿。

但實(shí)際上很多樣品是既含酸性基團(tuán)又含堿性基團(tuán)，這就要看哪個基團(tuán)作用強(qiáng)，對于某些含氨基的兩性樣品，例如苯甘氨酸，甲基磺酸是一個非常好的選擇。

有些樣品只添加堿或者酸效果不好，可以嘗試在樣品里同時添加酸堿，以獲得漂亮的峰形和良好的分離度。手性藥物分離

流動相里添加酸或堿以后，基本上不會提供額外的選擇性，但卻能提高分離度，因?yàn)榉逍魏昧?，相同的保留時間內(nèi)兩個峰之間的分離度自然就好了。

做純度分析檢測雜質(zhì)含量時，一般要求盡量采用低波長，讓盡可能多的雜質(zhì)有紫外吸收；而做手性分析時，我們需要采用盡可能高的波長，來去除在低波長下才有吸收的雜質(zhì)的干擾。

一般原則是盡量選擇樣品紫外吸收最好的波長來獲得較高的靈敏度，但流動相里如果添加二乙胺，會導(dǎo)致在低波長下基線波動變大，系統(tǒng)難以平衡，則要提高檢測波長。

有些樣品在高波長下吸收非常差，只能用低波長檢測，可以嘗試在樣品稀釋時加入過量的二乙胺(但不宜太多)。