手性色譜柱（Chiral HPLC Columns）是由具有光學活性的單體，固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相（Chiral Stationary Phases）。那么下面就跟著研創(chuàng)生物一起來看看手性色譜柱的五大常識吧！

　　1、色譜法

　　答：色譜法利用不同物質在不同相態(tài)的選擇性分配，以流動相對固定相中的混合物進行洗脫，混合物中不同的物質會以不同的速度沿固定相移動，最終達到分離的效果。常用的色譜檢測有高效液相色譜（HPLC）、超臨界色譜（SFC）、模擬移動床（SMB）、氣相色譜（GC）、薄層色譜（TLC）等，可根據(jù)樣品特性選擇最合適的色譜檢測方法。

　　2、正相&反相

　　答：液相色譜有正相和反相之分。如果固定相的極性大于流動相的極性，就稱為正相色譜；如果固定相的極性小于流動相的極性，則稱為反相色譜。在正相色譜中，極性小的物質先出峰，極性大的物質后出峰；反相則相反。在大賽璐開發(fā)的方法中，通常把以正己烷、醇、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、四氫呋喃等有機溶劑為流動相的方法稱為正相方法；把以水（中性、酸性或堿性）和有機溶劑共同作為流動相的方法稱為反相方法；把以100%的醇或乙腈做流動相的方法稱為極性模式。

　　3、多糖衍生物手性固定相的手性拆分機理

　　答：在多糖衍生物手性固定相上進行的拆分機理目前尚部完全清楚，基于Dalgliesh提出的“三點作用原理”，認為在對映體和CSP之前可能存在π-π作用、偶極-偶極作用、氫鍵作用及非手性作用（如空間效應）等作用力，這些作用力的綜合結果將使兩個對映體與固定相之間形成非對映體絡合物的穩(wěn)定性有差異而得到分離，且差異性越大，實現(xiàn)分離的可能性越大。

　　4、評價柱性能的參數(shù)

　　答：評價一支柱子性能的參數(shù)通常有：色譜峰的保留時間、理論塔板數(shù)、拖尾因子和分離度等。大賽璐新柱出廠都嚴格地經(jīng)過QC測試，并附有檢測報告。這里需要提出的是，因為表觀參數(shù)不但與柱子本身性能有關，與使用的儀器也有很大關系，不同儀器間的檢測結果會有差別。

　　5、手性柱的最大載樣量是多少？

　　答：手性柱的最大載樣量取決于柱子的尺寸、流動相條件及樣品本身的性質（溶解度等），因此很難給出一個明確的值。超出柱子的負載量（進樣體積太大或樣品濃度過高）會使得峰展寬或峰融合。